МОДЕЛИРОВАНИЕ ИНФЕКЦИИ SARS-COV-2 НА 3D-КУЛЬТУРАХ: ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СФЕРОИДОВ, ФОРМИРУЕМЫХ КЛЕТОЧНЫМИ КУЛЬТУРАМИ

В работе представлена апробация трёхмерной (3D) сфероидной модели на основе клеточной линии HEK-293T для изучения репликации различных геновариантов (Wuhan, Delta, Omicron) SARS-CoV-2. Сфероиды формировали в микролунках агарозного гидрогеля, затем инфицировали вирусными штаммами с последующим анализом концентрации вируса методом ОТ-ПЦР в реальном времени. Установлено накопление вирусной РНК для всех геновариантов, что свидетельствует о восприимчивости 3D-культуры на основе клеток HEK293T и её пригодности для моделирования SARS-CoV-2-инфекции.

1. Абрамова С.А., Ляпун И.Н., Дробот Е.И. и др. Динамика ферментативной активности в первичной культуре адгезивных лейкоцитов сирийского хомячка, заражённых SARS-CoV-2 ex vivo // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2025; 102(2): 168-178. DOI: 10.36233/0372-9311-649

2. Бахрушина Е.О., Михел И.Б., Кондратьева В.М. и др. In situ гели как современный способ интраназальной доставки вакцин // Вопросы вирусологии. 2022.; 67(5): 395-402. DOI: 10.36233/0507-4088-139

3. Беседнова Н.Н., Звягинцева Т.Н., Андрюков Б.Г. и др. Сульфатированные полисахариды морских водорослей как потенциальные средства профилактики и терапии гриппа и COVID19 // Антибиотики и химиотерапия. 2021; 66(7-8): 50-66.

4. Грибова В.В., Окунь Д.Б., Шалфеева Е.А. и др. Облачный сервис для дифференциальной клинической диагностики острых респираторных вирусных заболеваний (в том числе – связанных с особо опасными коронавирусами) методами искусственного интеллекта // Якутский медицинский журнал. 2020; (2): 44-47. DOI: 10.25789/YMJ.2020.70.13

5. Запорожец Т.С., Беседнова Н.Н., Калинин А.В. и др. 80 лет на страже биологической безопасности у восточных рубежей России // Здоровье населения и среда обитания. 2021; (5): 5-15. DOI: 10.35627/2219-5238/2021-338-5-5-15

6. Колобухина Л.В., Малышев Н.А., Меркулова Л.Н. и др. Изучение эффективности и безопасности нового противовирусного препарата Ингавирин® при лечении больных гриппом // Русский медицинский журнал. 2008; 16(22): 1502-1506.

7. Колобухина Л.В., Меркулова Л.Н., Малышев Н.А. и др. Стратегия ранней противовирусной терапии при гриппе как профилактика тяжелых осложнений // Пульмонология. Приложение. 2010; (1): 9-14.

8. Колобухина Л.В., Меркулова Л.Н., Щелканов М.Ю. и др. Пандемический грипп в России: отличительные особенности клинического течения и отсутствие ранней этиотропной терапии как фактор риска развития тяжёлых форм заболевания // Терапевтический архив. 2011; 83(9): 48-53.

9. Крылова Н.В., Персиянова Е.В., Белик А.А. и др. Геноварианты SARS-CoV-2 и их мутации, выявленные на территории Приморского края в период пандемии COVID-19 // Свидетельство о государственной регистрации базы данных № 2025622187; 23.05.2025.

10. Кузнецова Т.А., Беседнова Н.Н., Алиев М.Р., Щелканов М.Ю. Клеточные культуры в вирусологии: от прошлого к будущему // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2024. – Т. 101. – № 1. – С. 143-153. DOI: 10.36233/0372-9311-421

11. Кузнецова Т.А., Алиев М.Р., Михалко А.А., Щелканов М.Ю. 3D клеточные культуры: перспективы использования в вирусологии // Инфекция и иммунитет. 2024; 14(6): 1045-1062. DOI: 10.15789/2220-7619-DCC-17656

12. Кузнецова Т.А., Галкина И.В., Крыжановский С.П., Щелканов М.Ю. Органные (3Dклеточные) культуры в системе эпидемиологического надзора за вирусными инфекциями // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2025; 102(3): 370-380.

13. Попова А.Ю., Щелканов М.Ю., Крылова Н.В. и др. Генотипический портрет SARS-CoV-2 на территории Приморского края в период пандемии COVID-19 // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2024; 101(1): 19-35. DOI: 10.36233/0372-9311-497

14. Фоменко Е.П., Гапека А.В., Милованкин П.Г. и др. Эффективные животные модели для изучения SARS-CoV-2-инфекции // Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2024; (47): 36- 38.

15. Чернорыж Я.Ю., Кондратьева В.М., Малкова А.П. и др. Доклинические исследования безопасности интраназальной вакцины на основе вирусоподобных частиц для профилактики COVID19 // Вопросы вирусологии. 2025; 70(1): 35-46. DOI: 10.36233/0507-4088-278

16. Щелканов Е.М. Электризационная гипотеза отсутствия вшей (Anoplura Leach, 1815) у рукокрылых (Chiroptera Blumenbach, 1779) // Юг России: экология, развитие. 2021; 16(2): 6-16. DOI: 10.18470/1992‐1098‐2021‐2‐6‐16

17. Щелканов М.Ю., Власов Н.А., Киреев Д.Е. и др. Клинические признаки заболевания у птиц, вызванного высокопатогенными вариантами вируса гриппа А/H5N1, в эпицентре эпизоотии на юге Западной Сибири (июль 2005 г.) // Журнал инфекционной патологии. 2005; 12(3‐4): 121-124.

18. Щелканов М.Ю. Эволюция высоковирулентного вируса гриппа А (H5N1) в экосистемах Северной Евразии (2005–2009 гг.) // Дис. … д.б.н. М.: НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН, 2010; 488 с.

19. Щелканов М.Ю., Львов Д.К. Новый субтип вируса гриппа А от летучих мышей и новые задачи эколого-вирусологического мониторинга // Вопросы вирусологии. 2012; (Приложение 1): 159-168.

20. Щелканов М.Ю., Колобухина Л.В., Львов Д.К. Коронавирусы человека (Nidovirales, Coronaviridae): возросший уровень эпидемической опасности // Лечащий врач. 2013; 10: 49-54.

21. Щелканов М.Ю., Magassouba N’F., Boiro M.Y., Малеев В.В. Причины развития эпидемии лихорадки Эбола в Западной Африке // Лечащий врач. 2014; (11): 30-36.

22. Щелканов М.Ю., Ананьев В.Ю., Кузнецов В.В., Шуматов В.Б. Ближневосточный респираторный синдром: когда вспыхнет тлеющий очаг? // Тихоокеанский медицинский журнал. 2015; (2): 94- 98.

23. Щелканов М.Ю., Ананьев В.Ю., Кузнецов В.В., Шуматов В.Б. Эпидемическая вспышка Ближневосточного респираторного синдрома в Республике Корея (май-июль 2015 г.): причины, динамика, выводы // Тихоокеанский медицинский журнал. 2015; (3): 89-93.

24. Щелканов М.Ю., Кириллов И.М., Шестопалов А.М. и др. Эволюция вируса гриппа А / H5N1 (1996‐2016) // Вопросы вирусологии. 2016; 61(6): 7-18. DOI: 10.18821/0507‐4088‐2016‐61‐6‐245‐256

25. Щелканов М.Ю., Попова А.Ю., Дедков В.Г. и др. История изучения и современная классификация коронавирусов (Nidovirales: Coronaviridae) // Инфекция и иммунитет. 2020; 10(2): 221-246. DOI: 10.15789/2220-7619-HOI-1412

26. Щелканов М.Ю., Колобухина Л.В., Бургасова О.А. и др. COVID-19: этиология, клиника, лечение // Инфекция и иммунитет. 2020; 10(3): 421-445. DOI: 10.15789/2220-7619-CEC-1473

27. Щелканов М.Ю., Дунаева М.Н., Москвина Т.В. и др. Каталог вирусов рукокрылых (2020) // Юг России: экология, развитие. 2020; 15(3): 6-30. DOI: 10.18470/1992‐1098‐2020‐3‐6‐30

28. Щелканов М.Ю., Табакаева Т.В., Любченко Е.Н. и др. Рукокрылые: общая характеристика отряда. Владивосток: Изд-во ДВФУ, 2021; 130 с. DOI: 10.24866/7444-5119-6

29. Щелканов М.Ю. Этиология COVID-19 // В кн.: COVID-19: от этиологии до вакцинопрофилактики. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2023; 11-53.

30. Щелканов М.Ю., Татонова Ю.В., Табакаева Т.В. и др. Эндопаразиты рукокрылых: нематоды. Владивосток: Изд-во ДФВУ, 2023; 112 с. DOI: 10.61726/5457.2024.48.27.001

31. Ebisudani T., Sugimoto S., Haga K., et al. Direct derivation of human alveolospheres for SARSCoV-2 infection modeling and drug screening // Cell Rep. 2021; 35(10): 109218. DOI: 10.1016/j.celrep.2021.109218

32. Khotimchenko Yu.S., Shchelkanov M.Yu. Viruses of the Ocean: On the shores of the aqua incognita. Horizons of taxonomic diversity // Rus. J. Marine Biol. 2024; 50: 1-24. DOI: 10.1134/S106307402401005X

33. Krylova N.V., Kravchenko A.O., Likhatskaya G.N. et al. Carrageenans and the carrageenanechinochrome complex as anti-SARS-CoV-2 agents // International Journal of Molecular Sciences. 2025; 26(13): 6175. DOI: 10.3390/ijms26136175

34. Minin А., Semerikova T., Belousova A.V., et al. Spheroid Stamp: 3D cell spheroids for everyone // Bioprinting. 2025; 49: e00416. DOI: 10.1016/j.bprint.2025.e00416

35. Rosellini A., Freer G., Quaranta P., et al. Enhanced in vitro virus expression using 3-dimensional cell culture spheroids for infection // J. Virol. Meth. 2019; 265: 99-104. DOI: 10.1016/j.jviromet.2018.12.017

36. Saleh F., Harb A., Soudani N., Zaraket H. A three-dimensional A549 cell culture model to study respiratory syncytial virus infections // J. Infect. Public Health. 2020; 13(8) :1142-1147. DOI: 10.1016/j.jiph.2020.03.011

37. Shcheglov B.O., Galkina I.V., Shcheglova S.N., Shchelkanov M.Yu. Effectiveness of 3D modelling laboratory implementation into therapeutic and diagnostic medical institutions // Yakut Medical Journal. 2019; (3): 102-104. DOI: 10.25789/YMJ.2019.67.30